ПЦР-диагностика инфекционных заболеваний

Уже более 100 лет РУП «Институт экспериментальной ветеринарии им С.Н. Вышелесского» накапливает опыт в сфере повышения эффективности работы сельского хозяйства. С 2006 года в НИИ разрабатываются тест-системы для диагностики болезней бактериальной и вирусной этиологии серологическим (иммуноферментный анализ – ИФА) и молекулярно-генетическим методом (полимеразная цепная реакция – ПЦР).

Суть ПЦР заключается в амплификации, т.е. увеличении числа копий строго определенных фрагментов молекулы ДНК или РНК искомого инфекционного агента in vitro с последующей индикацией амплификона (амплифицируемый участок ДНК) методом электрофореза или другим методом.

Идентифицировать инфекционные агенты традиционными методами диагностики (микроскопическим, бактериологическим, биологическим) достаточно сложно. В свою очередь, ПЦР имеет высокую чувствительность и специфичность.

Существует множество вариантов постановки ПЦР, на практике чаще используются 2 варианта:

  • Качественная ПЦР (Qualitative PCR, Q-PCR)
  • Количественная ПЦР в режиме реального времени (Quantitative real-time PCR)

ПЦР включает три этапа:

  • Выделение ДНК (РНК) из исследуемого материала;
  • Амплификация специфических фрагментов ДНК;
  • Детекция продуктов амплификации.

Результат ПЦР с электрофоретической детекцией:

ПЦР в режиме реального времени (Real-Time PCR)

Метод ПЦР в режиме реального времени (Real-Time PCR) позволяет проводить детекцию продуктов амплификации в процессе реакции и вести мониторинг кинетики накопления ампликонов.

Результат ПЦР в варианте Real-time:

Предлагаем Вам перечень услуг по лабораторной диагностике:

Молекулярно-генетическим методом (ПЦР):

Крупный рогатый скот

Свиньи

Свиньи и крупный рогатый скот

ДНК вируса инфекционного ринотрахеита КРС

ДНК цирковируса второго типа (PCV-2) в биологическом материале (крови и др.)

Серовариантная принадлежность Pasteurella multocida – A, B, D

РНК вируса респираторно-синцитиальной инфекции КРС

РНК вируса PPCC в биологическом материале (крови и др.)

ДНК Mannheimia haemolytica

РНК вируса коронавирусной инфекции КРС

ДНК Bordetella bronchiseptica (инфекционный атрофический ринит)

ДНК Salmonella dublin

РНК вируса

парагриппа-3 КРС

ДНК вируса классической чумы свиней (CSFV) в биоматериале (крови и др.)

ДНК Salmonella typhimurium

РНК вируса вирусной диареи КРС

ДНК вируса африканской чумы свиней (ASFV) в биоматериале (крови и др.)

ДНК Salmonella choleraesuis

РНК вируса ротавирусной инфекции КРС (bovine rotavirus А)

ДНК возбудителя гемофилезного полисерозита свиней

(Болезнь Глессера, HPS)

ДНК Mycoplasma spp.

ДНК Mycoplasma bovis

ДНК возбудителя актинобациллярной плевропневмонии свиней (АРР)

ДНК возбудителя клостридиоза

(Clostridium perfringens)

ДНК возбудителя оспы

ДНК возбудителя парвовирусной инфекции свиней

ДНК возбудителя некробактериоза Fusobacterium necroforum

 

ДНК Mycoplasma hyopneumoniae (микоплазмоза свиней)

ДНК возбудителя

хламидиоза

 

ДНК возбудителя болезни

Ауески

ДНК Escherichia coli

(ELT – токсин)

 

ДНК возбудителя

стрептококкоза свиней

ДНК Pseudomonas aeruginosa

 

РНК возбудителя трансмиссивного гастроэнтерита свиней

ДНК возбудителя туберкулеза млекопитающих (Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium bovis)

Птицы

Пчелы

Мелкий рогатый скот

РНК реовируса птиц

ДНК Melissococcus plutonius

(европейский гнилец пчел)

ДНК возбудителя оспы

 

ДНК Paenibacillus larvae

(американский гнилец пчел)

 

Серологическим методом (ИФА):

  • - определение специфических антител против вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней (РРСС) в сыворотке крови;
  • - определение специфических антител против вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней (ТГС) в сыворотке крови;
  • - обнаружение антител и контроль поствакцинального иммунитета к реовирусу птиц;
  • - обнаружение антимикобактериальных (туберкулез) антител и антигенов в молоке и крови у крупного рогатого скота и определение их специфичности в иммуноферментном анализе.

 

Для ПЦР-исследований рекомендуется направлять не менее трёх проб от одной группы животных в свежем (можно в замороженном виде), отобранных с учётом тропизма возбудителя.

 

Для исследования принимается биологический и патологический материал от млекопитающих, птиц, пчёл:

  • - биологический материал (кровь, сыворотка крови, сперма, носовая и влагалищная слизь, фекалии, содержимое свищей, абсцессов, гной, экссудат, моча, желчь, глубокие соскобы подошвенной части копыта и др.);
  • - патологический материал (кусочки паренхиматозных органов, участок кишечника перевязанный лигатурами и упакованный отдельно, сердце целиком, лимфоузлы, головной мозг, кусочки мышечной ткани, трубчатая кость и др.).

 

Материал отбирается в соответствии с установленными нормативными документами, с соблюдением правил асептики и антисептики, доставляется в виде кусочков органов весом 10–100 г от каждого животного материал (кусочки органов) упаковывается отдельно.

 

Фекалии, носовая слизь, влагалищная слизь и другие биологические жидкости доставляются в герметично закрытых пробирках объёмом 1-10 мл, или (в пробирках лабораторных с пробкой или в микроцентрифужных пробирках типа Эппендорф или в завязанных полиэтиленовых пакетиках с помещенными туда пробами на ватных тампонах (стерильных зондах-тампонах) или палочках ватных косметических (ушных палочках).

 

При ПЦР-диагностике замороженный материал можно хранить до 1 месяца в плотно закрытой упаковке, исключающей высыхание проб, на ватных тампонах или ватных косметических палочках.

 

РУП "Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского", 220063, ул. Брикета, 28, Минск, Беларусь

 

Тел./факс (приёмная):
+375 17 517 32 61, +375 17 517 32 72

 

Рабочее время: пн-пт с 8:30 до 17:00, обед с 12:30 до 13:00

 

E-mail: bievmomb@gmail.com

 

Отдел молекулярной биологии:

Заказать ПЦР- и ИФА-исследование, а также узнать стоимость можно по телефонам:

 

+375 25 9780058 (Тяпша Юрий Иванович)