Лабораторная диагностика возбудителей инфекций
крупного рогатого скота, свиней, птиц и пчел
Уже более 100 лет РУП «Институт экспериментальной ветеринарии им С.Н. Вышелесского» накапливает опыт в сфере повышения эффективности работы сельского хозяйства. С 2006 года в НИИ разрабатываются тест-системы для диагностики болезней бактериальной и вирусной этиологии серологическим (иммуноферментный анализ – ИФА) и молекулярно-генетическим методом (полимеразная цепная реакция – ПЦР).
Суть ПЦР заключается в амплификации, т.е. увеличении числа копий строго определенных фрагментов молекулы ДНК или РНК искомого инфекционного агента in vitro с последующей индикацией амплификона (амплифицируемый участок ДНК) методом электрофореза или другим методом.
Идентифицировать инфекционные агенты традиционными методами диагностики (микроскопическим, бактериологическим, биологическим) достаточно сложно. В свою очередь, ПЦР имеет высокую чувствительность и специфичность.
Существует множество вариантов постановки ПЦР, на практике чаще используются 2 варианта:
- Качественная ПЦР (Qualitative PCR, Q-PCR)
- Количественная ПЦР в режиме реального времени (Quantitative real-time PCR)
ПЦР включает три этапа:
- Выделение ДНК (РНК) из исследуемого материала;
- Амплификация специфических фрагментов ДНК;
- Детекция продуктов амплификации.
Результат ПЦР с электрофоретической детекцией:
ПЦР в режиме реального времени (Real-Time PCR)
Метод ПЦР в режиме реального времени (Real-Time PCR) позволяет проводить детекцию продуктов амплификации в процессе реакции и вести мониторинг кинетики накопления ампликонов.
Результат ПЦР в варианте Real-time:
Предлагаем Вам перечень услуг по лабораторной диагностике:
Молекулярно-генетическим методом (ПЦР):
Крупный рогатый скот | Свиньи | Свиньи и крупный рогатый скот |
ДНК вируса инфекционного ринотрахеита КРС | ДНК цирковируса второго типа (PCV-2) в биологическом материале (крови и др.) | Серовариантная принадлежность Pasteurella multocida – A, B, D |
РНК вируса респираторно-синцитиальной инфекции КРС | РНК вируса PPCC в биологическом материале (крови и др.) | ДНК Mannheimia haemolytica |
РНК вируса коронавирусной инфекции КРС | ДНК Bordetella bronchiseptica (инфекционный атрофический ринит) | ДНК Salmonella dublin |
РНК вируса парагриппа-3 КРС | ДНК вируса классической чумы свиней (CSFV) в биоматериале (крови и др.) | ДНК Salmonella typhimurium |
РНК вируса вирусной диареи КРС | ДНК вируса африканской чумы свиней (ASFV) в биоматериале (крови и др.) | ДНК Salmonella choleraesuis |
РНК вируса ротавирусной инфекции КРС (bovine rotavirus А) | ДНК возбудителя гемофилезного полисерозита свиней (Болезнь Глессера, HPS) | ДНК Mycoplasma spp. |
ДНК Mycoplasma bovis | ДНК возбудителя актинобациллярной плевропневмонии свиней (АРР) | ДНК возбудителя клостридиоза (Clostridium perfringens) |
ДНК возбудителя оспы | ДНК возбудителя парвовирусной инфекции свиней | ДНК возбудителя некробактериоза Fusobacterium necroforum |
ДНК Mycoplasma hyopneumoniae (микоплазмоза свиней) | ДНК возбудителя хламидиоза | |
ДНК возбудителя болезни Ауески | ДНК Escherichia coli (ELT – токсин) | |
ДНК возбудителя стрептококкоза свиней | ДНК Pseudomonas aeruginosa | |
РНК возбудителя трансмиссивного гастроэнтерита свиней | ДНК возбудителя туберкулеза млекопитающих (Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium bovis) | |
Птицы | Пчелы | Мелкий рогатый скот |
РНК реовируса птиц | ДНК Melissococcus plutonius (европейский гнилец пчел) | ДНК возбудителя оспы |
ДНК Paenibacillus larvae (американский гнилец пчел) |
Серологическим методом (ИФА):
- - определение специфических антител против вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней (РРСС) в сыворотке крови;
- - определение специфических антител против вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней (ТГС) в сыворотке крови;
- - обнаружение антител и контроль поствакцинального иммунитета к реовирусу птиц;
- - обнаружение антимикобактериальных (туберкулез) антител и антигенов в молоке и крови у крупного рогатого скота и определение их специфичности в иммуноферментном анализе.
Для ПЦР-исследований рекомендуется направлять не менее трёх проб от одной группы животных в свежем (можно в замороженном виде), отобранных с учётом тропизма возбудителя.
Для исследования принимается биологический и патологический материал от млекопитающих, птиц, пчёл:
- - биологический материал (кровь, сыворотка крови, сперма, носовая и влагалищная слизь, фекалии, содержимое свищей, абсцессов, гной, экссудат, моча, желчь, глубокие соскобы подошвенной части копыта и др.);
- - патологический материал (кусочки паренхиматозных органов, участок кишечника перевязанный лигатурами и упакованный отдельно, сердце целиком, лимфоузлы, головной мозг, кусочки мышечной ткани, трубчатая кость и др.).
Материал отбирается в соответствии с установленными нормативными документами, с соблюдением правил асептики и антисептики, доставляется в виде кусочков органов весом 10–100 г от каждого животного материал (кусочки органов) упаковывается отдельно.
Фекалии, носовая слизь, влагалищная слизь и другие биологические жидкости доставляются в герметично закрытых пробирках объёмом 1-10 мл, или (в пробирках лабораторных с пробкой или в микроцентрифужных пробирках типа Эппендорф или в завязанных полиэтиленовых пакетиках с помещенными туда пробами на ватных тампонах (стерильных зондах-тампонах) или палочках ватных косметических (ушных палочках).
При ПЦР-диагностике замороженный материал можно хранить до 1 месяца в плотно закрытой упаковке, исключающей высыхание проб, на ватных тампонах или ватных косметических палочках.
РУП "Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского", 220063, ул. Брикета, 28, Минск, Беларусь
Тел./факс (приёмная):
+375 17 517 32 61, +375 17 517 32 72
Рабочее время: пн-пт с 8:30 до 17:00, обед с 12:30 до 13:00
E-mail: bievmomb@gmail.com
Отдел молекулярной биологии:
Заказать ПЦР- и ИФА-исследование, а также узнать стоимость можно по телефонам:
+375 29 5773316 (Красникова Елена Леонидовна)